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二．查找:马铃薯M病毒(PVM)ELISA试剂盒2023@实验室动态操作步骤：

 1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封 袋密封放回 4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；

3. 样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 （HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴 锅或恒温箱温育 60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去 洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

关于马铃薯M病毒(PVM)ELISA试剂盒常见的问题答疑——

1.【非正常的样本值问题】

上海轩泽康生物解答：可能造成原因：不正确的收集或保存；不正确的样本制备。

解决方案：确保正确的底物体积并混合。如果底物是冻干粉，用相应缓冲液重悬完，全，充分混合并在一定的期限内使用；说明书中样本制备方法已经过性能测试验证，严格按照说明书推荐进行样本制备。确保使用正确的校正稀释液。

2.【边缘效应问题】

上海轩泽康生物解答：可能造成原因：工作台温度不均衡；体系液体蒸发。

解决方案：避免再环境条件变化的位置孵育96孔板（如放置在通风处或窗台边）；保，证移液器正常工作，必要时进行重新校正。保，证移液器吸头连接紧密。使用同一移液器吸取方式。

原创作者：上海轩泽康生物有限公司